Prodotti chimici e supporti diversi utilizzati in un laboratorio di microbiologia

Prodotti chimici e supporti diversi utilizzati in un laboratorio di microbiologia!

In laboratorio, i batteri vengono coltivati ​​su sostanze nutritive chiamate "media". Una varietà di media è richiesta anche per usi specifici.

I componenti del materiale vengono pesati in una data proporzione, miscelati nella quantità d'acqua richiesta e sterilizzati in autoclave. I batteri vengono inoculati e lasciati crescere.

La pesatura degli ingredienti dei media è un lavoro noioso e alcuni ingredienti possono essere ignorati inconsapevolmente. Per ovviare a questa difficoltà, sono disponibili supporti pronti all'uso in polvere.

Questi media contengono tutti gli ingredienti nelle proporzioni prescritte. Ad una determinata quantità di polvere (come indicato sull'etichetta della confezione), viene aggiunta e sterilizzata una quantità specifica di acqua.

I media di cultura sono dei seguenti tipi:

I. Mezzi definiti chimicamente:

I media definiti chimicamente o i media sintetici sono i media in cui possono essere determinati tutti i prodotti chimici specifici (molecole e atomi) e le loro concentrazioni. Le sostanze chimiche possono includere H ₂ 0, NaCl, Na ₂ S0 ₄, KCI e agar. Esempi: brodo sintetico inorganico, brodo di sale di glucosio.

II. Media complessi:

I media complessi sono i media, in cui non è possibile determinare tutti i prodotti chimici specifici (molecole e atomi) e le loro concentrazioni. Per i batteri fastidiosi, alcune sostanze complesse, come l'estratto di manzo, l'estratto di lievito e il peptone sono usati nei media, la cui composizione chimica esatta (molecole e atomi) varia considerevolmente e non è nota. Questi media sono utilizzati principalmente per la crescita abbondante dei batteri. Esempi: brodo nutriente e agar nutriente.

III. Media specializzati:

Questi media sono usati per scopi specifici, piuttosto che solo per la crescita dei batteri.

In base allo scopo di utilizzo, sono dei seguenti tipi:

1. Media selettivi:

Sono i media contenenti una composizione specifica di ingredienti, che supporta la crescita di alcuni batteri bersaglio e inibisce la crescita degli altri. Sono usati per isolare specifici gruppi di batteri.

Quando un particolare gruppo di batteri cresce in un terreno selettivo, manifesta caratteristiche tipiche della colonia, che aiutano nella sua individuazione ed enumerazione in vari campioni. I particolari batteri di interesse, trovati come colonie isolate sono presi per ulteriori test per l'identificazione confermata. A volte, i media selettivi vengono anche usati come media differenziale.

Gli esempi di media selettivi sono riportati di seguito:

(a) Agar MacConkey:

È usato per coltivare specie di batteri gram-negativi. Il cristalvioletto utilizzato nel terreno inibisce la crescita dei batteri gram-positivi, consentendo al tempo stesso la crescita delle specie gram-negative.

(b) Agar EMB:

Eosine blu metilene agar (agar EMB) viene utilizzato per coltivare specie di batteri gram-negativi. Inibisce parzialmente la crescita dei batteri gram-positivi, a causa dei quali le specie gram-negative di batteri crescono in modo più abbondante. Viene anche utilizzato nell'identificazione della forma enterica di coli Escherichia coli, che cresce su di essa come colonie blu-nere con una lucentezza metallica verde.

Altri coliformi enterici, come Enterobacter aerogenes, crescono su di esso come colonie spesse, mucose e rosa. Oltre a questi lattosio-fomentanti, crescono anche lattosio-non-fomentanti, ma come colonie incolori, per le quali assumono il colore viola del mezzo.

(c) agar sale di mannitolo:

È usato per coltivare Staphylococcus spp. L'elevata concentrazione di sale (7, 5% di NaCl) presente nel terreno inibisce la crescita della maggior parte degli altri batteri. Differisce anche Staphylococcus in Staphylococcus che fermenta mannitolo, che cresce con zone gialle che circondano le colonie e Stafilococco mannitolo non fermentante, che cresce senza variazioni di colorazione.

2. Media differenziale:

Sono i media, su cui crescono diversi batteri come colonie, con diverse caratteristiche visive.

Gli esempi di media differenziali sono riportati di seguito:

(a) Agar MacConkey:

Su questo terreno, i normali batteri intestinali non patogeni, che sono i fermentatori del lattosio, crescono come colonie rosse, mentre i batteri patogeni intestinali, che sono lattosio-non-fermentatori, crescono come colonie incolori.

(b) Agar sangue:

Il sangue è il costituente importante di questo mezzo. È un ingrediente di arricchimento per i batteri fastidiosi come Streptococcus spp.

È usato per differenziare le proprietà degli streptococchi per produrre diversi tipi di emolisi del sangue come segue:

(i) α-emolisi:

Qui, si verifica una distruzione parziale dei globuli rossi, con conseguente zone di colore verde attorno alle colonie a causa della riduzione dell'emoglobina a metaemoglobina.

(ii) β-emolisi:

Qui, si verifica l'emolisi completa dei globuli rossi, con conseguente chiara zona intorno alle colonie. Questa emolisi è causata da due tipi di emolisine, vale a dire "streptolizina O", che è un enzima antigenica ossigeno-labili e "streptolizina S", che è una lisina non stabilizzata all'ossigeno antigenica.

(iii) y-emolisi:

Qui, non si verifica emolisi, risultante in nessuna zona intorno alle colonie.

3. Mezzi di trasporto:

Sono i media utilizzati per il breve trasporto di batteri, durante i quali la crescita è indesiderabile. Tali supporti contengono solo buffer e sale. I media non contengono alcuna fonte di C, N e altri fattori di crescita. Previene la crescita microbica.

4. Media di arricchimento:

Sono i media, in cui la percentuale relativa dei batteri bersaglio è arricchita, in quanto contengono i nutrienti per i batteri bersaglio, mentre nessuno per gli altri. Ad esempio, la materia fecale contiene un numero molto basso di Salmonella e Shigella.

Per isolarli, vengono prima coltivati ​​in brodo di selenite o GN (gram-negativo), in cui solo Salmonella e Shigella crescono copiosamente, mentre altri non crescono e rimarranno in fase di latenza. Quindi, questo viene striato su supporti solidi per ottenere colonie di Salmonella e Shigella.

5. Supporti arricchiti:

Sono i media utilizzati per supportare la crescita di tipi massimi di batteri.

6. Mezzi biochimici:

Questi mezzi sono utilizzati per testare le attività biochimiche dei batteri, che aiutano nella loro identificazione. Di seguito è riportato un elenco di importanti mezzi biochimici utilizzati nei test biochimici effettuati per l'identificazione di diversi batteri.