Note utili su Enzyme Papain e Enzyme Pepsin
Le immunoglobuline sono proteine e sono generalmente resistenti alla digestione da parte degli enzimi.
Tuttavia, l'enzima papaina e la pepsina scindono le molecole di immunoglobulina. I frammenti generati da papaina e pepsina sono utili per gli studi sulla struttura e le funzioni delle immunoglobuline. Ma i siti di scissione di questi due enzimi sono diversi (Figura 9.5).
Fig. 9.5: Schema schematico della frammentazione proteolitica dell'immunoglobulina mediante trattamento breve con enzimi papaina e pepsina.
L'enzima papaina scinde l'immunoglobulina sul lato N-terminale del legame disolfuro catena pesante e produce tre frammenti (due frammenti Fab e un frammento Fc). L'enzima pepsina scinde l'immunoglobulina nella regione C-terminale e produce un grande frammento (che contiene due regioni Fab) chiamato F (ab ') 2 . Le restanti catene pesanti sul lato C-terminale vengono digerite in più piccoli peptidi
1. Enzyme Papain:
La papaina dell'enzima scinde la regione della cerniera sul lato N-terminale dei disolfuri inter-pesanti della catena e questo porta alla formazione di tre frammenti. (Due frammenti contenenti la regione variabile e un frammento contenente le regioni C H 2 e C H 3). I due frammenti contenenti la regione variabile sono chiamati; Frammenti Fab, (cioè legamento dell'antigene del frammento) in quanto hanno i siti che legano l'antigene.
Il terzo frammento comprende le parti carbossilerminali di entrambe le catene pesanti tenute insieme dai disolfuri. Generalmente la struttura del terzo frammento è identica per molte diverse molecole di immunoglobuline.
Quindi frammenti di questi tipi possono essere cristallizzati anche se consistono di molte diverse immunoglobuline. Quindi, questo frammento è chiamato frammento cristallino o frammento Fc. La maggior parte delle proprietà biologiche secondarie delle immunoglobuline dipendono dalle sequenze nella regione Fc. Anche questa è la regione riconosciuta dai recettori Fc su molti tipi di cellule.
2. Pepsina enzima:
La pepsina enzima scinde l'immunoglobulina sul lato carbossi-terminale della regione della cerniera risultante in un grande frammento chiamato F (ab ') 2 . La F (ab ') 2 ha due frammenti Fab collegati da legami disolfuro. La regione Fc è ampiamente degradata dalla pepsina e di solito non rimane alcun frammento di Fc intatto dopo la digestione con pepsina.
